| 型號(hào) | PDS-1000/HE | 聯(lián)系人 | 孫海宏 |
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青海省農(nóng)科院大型儀器基本信息表
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儀器設(shè)備基本信息 |
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儀器中文名稱 |
基因槍 |
生產(chǎn)廠商 |
美國(guó)BIO-RAD公司 |
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儀器英文名稱 |
Gene gun |
生產(chǎn)國(guó)別 |
美國(guó) |
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儀器規(guī)格型號(hào) |
PDS-1000/HE |
儀器分類 |
基因和生命科學(xué)儀器 |
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生產(chǎn)日期 |
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購(gòu)進(jìn)日期 |
2004.06 |
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功能和應(yīng)用范圍： 利用可在常溫下急劇升溫膨脹的高壓氦氣為推動(dòng)劑發(fā)射高速微彈（含遺傳物質(zhì)或其他附著物質(zhì)）直接射入細(xì)胞、組織和細(xì)胞器，適用于動(dòng)植物、細(xì)胞培養(yǎng)物、胚胎、細(xì)菌及小型動(dòng)物的轉(zhuǎn)基因。 |
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主要技術(shù)指標(biāo)： 1、轟擊參數(shù) (psi) 顆粒大小： 細(xì)菌 29 6 1,100 M5 鎢 藻類：29 6 1,300 0.6 μm 金 胚芽： 28 6 1,300 1.0 μm 金 愈傷組織或愈傷組織或 28 9 1,100 1.0 μm 金 細(xì)胞器 28 6 1,300 0.6 μm 金 組織培養(yǎng) 15 3 1,100 1.6 μm 金 組織切片 25 9 1,100 1.6 μm 金 2、系統(tǒng)指標(biāo)： 動(dòng)力源： 氦氣（He），惰性氣體保證不污染樣品 壓力范圍： 450，650，900，1100，1350，1550，1800， 2200 Psi，適應(yīng)不同樣品要求 基因載體： 0.6, 1.0, 1.6微米直徑金粉，0.4, 0.7, 1.1, 1.3, 1.7微米鎢粉 系統(tǒng)配件： 金粉載體；阻擋網(wǎng)；壓力釋放盤(pán) 靶細(xì)胞距離： 3擋可調(diào)
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主要用途： 適用于動(dòng)植物、細(xì)胞培養(yǎng)物、胚胎、細(xì)菌及小型動(dòng)物的轉(zhuǎn)基因。
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樣品前處理要求： 微彈的制備： 1、EP管稱取60 mg (或3mg)金粉； 3、棄上清，加入1ml(或50ul) 無(wú)菌水洗，振蕩1min,10000rpm離心10S； 4、棄上清，加入1ml(或50ul) 無(wú)菌水洗，振蕩1min,-20℃； DNA的包裹： 1、50ul金粉懸液于EP管； 2、依次加入5ul/3ul質(zhì)粒DNA（1ug/ul）,50ul2.5MCaCl2 和20ul0.1M亞精胺（每加完一樣可振蕩 3S），靜置10min； 3、振蕩3S，冰上10min，10000rpm離心10S，棄上清； 4、80ul無(wú)水乙醇，震蕩重懸，10000rpm離心10S，棄上清； 5、10ul無(wú)水乙醇定容（重懸）； 6、每次用10ul點(diǎn)于微粒載膜中央，使其平鋪，晾至完全干燥，待用； 基因槍的操作： 1、打開(kāi)真空泵和基因槍的電源開(kāi)關(guān)； 2、打開(kāi)氦氣瓶閥門，旋轉(zhuǎn)氦氣調(diào)節(jié)桿，使氣壓高于所選可裂膜壓力200psi左右； 3、旋下可裂膜擋蓋，將可裂膜放在擋蓋中央，將擋蓋旋上，用專用板水平加固； 4、把微粒發(fā)射裝置移出轟擊室，旋下蓋子，放入阻擋網(wǎng)，把微粒載片安裝在固定槽中（有微粒的一面朝下），旋上蓋子，將發(fā)射裝置放回轟擊室； 5、將樣品盤(pán)放置在轟擊室的適當(dāng)位置，關(guān)上轟擊室門； 6、按VAC開(kāi)關(guān)(上檔)抽真空，當(dāng)表上讀數(shù)為所需值時(shí),開(kāi)關(guān)打到HOLD（下檔），然后按住FIER開(kāi)關(guān)，當(dāng)達(dá)到適當(dāng)壓力可裂膜自動(dòng)破裂，松開(kāi)FIER開(kāi)關(guān)； 7、開(kāi)關(guān)打到VENT（中間檔），以釋放轟擊室內(nèi)的真空； 8、打開(kāi)轟擊室門，取出樣品盤(pán)； 10、旋下可裂膜擋蓋，清除可裂膜碎片； 11、若PDS—1000/He 型基因槍不再使用，關(guān)掉氦氣瓶的主閥，按住FIER開(kāi)關(guān)，按住FIE開(kāi)關(guān)，放掉氣體加速管內(nèi)的氦氣壓力，最后關(guān)掉一切電源；
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儀器設(shè)備相關(guān)信息 |
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儀器負(fù)責(zé)人 |
孫海宏 |
聯(lián)系電話： |
0971-5312130 |
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檢測(cè)項(xiàng)目 |
基因?qū)?/span> |
通過(guò)計(jì)量認(rèn)證 |
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所在實(shí)驗(yàn)室 |
青藏高原生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 |
電子郵箱 |
shh1328@16..com |
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檢測(cè)樣品 |
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通過(guò)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可 |
通過(guò)（）未通過(guò)（ ） |
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檢定情況 |
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啟用日期 |
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儀器狀態(tài)信息 |
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運(yùn)行狀態(tài) |
正常（ ）維修（ ）停用（ √ ） |
新開(kāi)發(fā)功能 |
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安放地點(diǎn) |
農(nóng)牧實(shí)驗(yàn)樓304室 |
升級(jí)改造單位 |
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使用方式 |
對(duì)外開(kāi)放（ ） 不開(kāi)放（√） |
計(jì)量校準(zhǔn)日期 |
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備注：
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