儀器設備基本信息

儀器中文名稱

基因槍

生產(chǎn)廠商

美國BIO-RAD公司

儀器英文名稱

Gene gun

生產(chǎn)國別

美國

儀器規(guī)格型號

PDS-1000/HE

儀器分類

基因和生命科學儀器

生產(chǎn)日期

購進日期

2004.06

功能和應用范圍：

利用可在常溫下急劇升溫膨脹的高壓氦氣為推動劑發(fā)射高速微彈（含遺傳物質(zhì)或其他附著物質(zhì)）直接射入細胞、組織和細胞器，適用于動植物、細胞培養(yǎng)物、胚胎、細菌及小型動物的轉(zhuǎn)基因。

主要技術指標：

1、轟擊參數(shù)

 (psi) 顆粒大小：

細菌 29 6 1,100 M5 鎢
酵母菌：28 6 1,300 0.6 μm 金 

藻類：29 6 1,300 0.6 μm 金

胚芽： 28 6 1,300 1.0 μm 金 

愈傷組織或愈傷組織或 28 9 1,100 1.0 μm 金 

細胞器 28 6 1,300 0.6 μm 金

組織培養(yǎng) 15 3 1,100 1.6 μm 金

組織切片 25 9 1,100 1.6 μm 金

2、系統(tǒng)指標：

動力源： 氦氣（He），惰性氣體保證不污染樣品

壓力范圍： 450，650，900，1100，1350，1550，1800， 2200 Psi，適應不同樣品要求

  基因載體： 0.6, 1.0, 1.6微米直徑金粉，0.4, 0.7, 1.1, 1.3, 1.7微米鎢粉

  系統(tǒng)配件： 金粉載體；阻擋網(wǎng)；壓力釋放盤

  靶細胞距離： 3擋可調(diào)

主要用途：

適用于動植物、細胞培養(yǎng)物、胚胎、細菌及小型動物的轉(zhuǎn)基因。

樣品前處理要求：

微彈的制備：

1、EP管稱取60 mg (或3mg)金粉；
2、加入1ml (或50ul)無水乙醇，振蕩1min,10000rpm離心10S；

3、棄上清，加入1ml(或50ul) 無菌水洗，振蕩1min,10000rpm離心10S；

4、棄上清，加入1ml(或50ul) 無菌水洗，振蕩1min,-20℃；

DNA的包裹：

1、50ul金粉懸液于EP管；

2、依次加入5ul/3ul質(zhì)粒DNA（1ug/ul）,50ul2.5MCaCl2 和20ul0.1M亞精胺（每加完一樣可振蕩     3S），靜置10min；

3、振蕩3S，冰上10min，10000rpm離心10S，棄上清；

4、80ul無水乙醇，震蕩重懸，10000rpm離心10S，棄上清；

5、10ul無水乙醇定容（重懸）；

6、每次用10ul點于微粒載膜中央，使其平鋪，晾至完全干燥，待用；

基因槍的操作：

1、打開真空泵和基因槍的電源開關；

2、打開氦氣瓶閥門，旋轉(zhuǎn)氦氣調(diào)節(jié)桿，使氣壓高于所選可裂膜壓力200psi左右；

3、旋下可裂膜擋蓋，將可裂膜放在擋蓋中央，將擋蓋旋上，用專用板水平加固；

4、把微粒發(fā)射裝置移出轟擊室，旋下蓋子，放入阻擋網(wǎng)，把微粒載片安裝在固定槽中（有微粒的一面朝下），旋上蓋子，將發(fā)射裝置放回轟擊室；

5、將樣品盤放置在轟擊室的適當位置，關上轟擊室門；

6、按VAC開關(上檔)抽真空，當表上讀數(shù)為所需值時,開關打到HOLD（下檔），然后按住FIER開關，當達到適當壓力可裂膜自動破裂，松開FIER開關；

7、開關打到VENT（中間檔），以釋放轟擊室內(nèi)的真空；

8、打開轟擊室門，取出樣品盤；
9、取出微粒發(fā)射裝置，卸下微粒載膜和阻擋網(wǎng)（阻擋網(wǎng)和微粒載膜放入70%的酒精浸泡）；

10、旋下可裂膜擋蓋，清除可裂膜碎片；

11、若PDS—1000/He 型基因槍不再使用，關掉氦氣瓶的主閥，按住FIER開關，按住FIE開關，放掉氣體加速管內(nèi)的氦氣壓力，最后關掉一切電源；

儀器設備相關信息

儀器負責人

孫海宏

聯(lián)系電話：

0971-5312130

檢測項目

基因?qū)?/span>

通過計量認證

所在實驗室

青藏高原生物技術教育部重點實驗室

電子郵箱

shh1328@16..com

檢測樣品

通過實驗室認可

通過（）未通過（  ）

檢定情況

啟用日期

儀器狀態(tài)信息

運行狀態(tài)

正常（ ）維修（  ）停用（ √ ）

新開發(fā)功能

安放地點

農(nóng)牧實驗樓304室

升級改造單位

使用方式

對外開放（ ） 不開放（√）

計量校準日期

備注：